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小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒實驗使用說明書
發布時間:2025/5/8瀏覽:439次
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  以下是關于小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南:

  BS-2016  小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒

  一、試劑盒組成?

  預包被酶標板?:96孔或48孔規格,含抗小鼠CXCR3單抗

  標準品?:通常為80ng/瓶或240ng/L濃度,提供2-5瓶

  檢測試劑?:

  酶標抗體工作液(HRP標記)

  顯色液(TMB A/B液)

  終止液(硫酸溶液)

  輔助溶液?:

  10×標本稀釋液、20×濃縮洗滌液

  封板膜、密封袋等耗材

  二、樣本處理?

  樣本類型?:血清、血漿、細胞上清液或組織勻漿

  處理方法?:

  血清/血漿?:1000-3000×g離心10-30分鐘,去除顆粒或纖維蛋白

  細胞上清?:離心去除細胞碎片

  組織勻漿?:生理鹽水勻漿后離心取上清

  保存條件?:-20℃分裝凍存,避免反復凍融

  三、實驗步驟?(雙抗體夾心法)

  標準品稀釋?:用標準品稀釋液配制梯度濃度(如0-400 ng/L)

  加樣?:

  每孔加入100μL標準品或樣本,37℃孵育1-2小時

  洗滌?:甩干孔內液體,加滿洗滌液靜置30秒,重復3-5次

  加酶標抗體?:每孔加入100μL HRP標記抗體,37℃孵育30-60分鐘

  顯色?:加入TMB底物避光反應15-30分鐘

  終止與檢測?:

  加終止液(50μL/孔)后立即測定450nm OD值

  根據標準曲線計算樣本濃度

  四、注意事項?

  溫度控制?:

  試劑使用前需室溫平衡20分鐘,避免低溫影響靈敏度

  顯色反應需嚴格避光

  操作規范?:

  避免孔間交叉污染,使用獨立槍頭

  邊緣孔易出現“邊緣效應",建議棄用外周孔

  數據有效性?:

  標準曲線R2應≥0.99,復孔CV值<15%

  五、常見問題?

  靈敏度下降?:可能因試劑未恢復至室溫或超過有效期

  背景過高?:洗滌不或樣本溶血導致

  如需完整說明書或技術支持,建議聯系廠商獲取最新版本。

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